Гиполипидемический эффект арглабина в клеточной культуре гепатомы

Abstract

Цель исследования - оценить in vitro фармакологические эффекты сесквитерпенового гамма-лактона арглабина в качестве потенциального гиполипидемического средства. Материал и методы. Изучали влияние сесквитерпенового гамма-лактона арглабина и гемфиброзила (препарат сравнения) на содержание липидов в клеточной культуре гепатомы крыс (hepatoma tissue culture - HTC) флуоресцентным методом с витальным красителем Nile Red при инкубации клеток с жировой эмульсией липофундином. Жизнеспособность клеток оценивали с помощью МТТ-теста и окрашиванием трипановым синим. Результаты. Культивирование клеточной культуры гепатомы крыс (HTC) с арглабином и гемфиброзилом в концентрациях от 10 до 50 мкмоль и от 0,25 до 0,5 ммоль соответственно не оказывало цитотоксического действия. Жизнеспособность клеток НТС не изменялась по сравнению с соответствующим показателем контрольной культуры. Экспериментальную гиперлипидемию в культуре гепатомы индуцировали добавлением в инкубационную среду жировой эмульсии липофундина в конечной концентрации 0,05%. Интенсивность флуоресценции Nile Red в клетках возрастала в 4 раза (p менее 0,05), что свидетельствует о существенном накоплении липидов в цитозоле клеток. В этих условиях арглабин в концентрациях 75 и 100 мкмоль и гемфиброзил в диапазоне концентраций 0,25-1,0 ммоль снижали содержание липидов в клетках. Заключение. На модели гиперлипидемии, индуцированной липофундином, добавление сесквитерпенового гамма-лактона арглабина в инкубационную среду препятствует накоплению липидов в клетках НТС, о чем свидетельствует уменьшение флуоресценции Nile Red. Однако гиполипидемическое действие арглабина ассоциировано с цитотоксическим эффектом, характерным для противоопухолевых препаратов.

Objective. Investigation of hypolipidemic effect of sesquiterpene γ-lactone Arglabin in hepatoma tissue culture (HTC). Materials and methods. In this study we’ve evaluated the effect of sesquiterpene γ-lactone Arglabin and gemfibrozil (reference drug) on the lipid content in the hepatoma tissue culture (HTC) which were incubated with a fat emulsion “Lipofundin” by fluorescent method with vital dye Nile Red. The cell viability was investigated using the MTT-test and staining by Trypan blue. Results. Cultivation of cell cultures of rat’s hepatoma cell line HTC with Arglabin and gemfibrozil in concentrations from 10 to 50 μmol and from 0.25 to 0.5 mmol, respectively, had no cytotoxic effect. HTC cell viability did not change compared with the corresponding rate in the control culture. Experimental hyperlipidemia in hepatoma culture was induced by the addition in the incubation medium of fat emulsion “Lipofundin” in a final concentration of 0.05 %. The fluorescence intensity of Nile Red in the cells was increased 4-fold (p less 0.05), which indicates a significant accumulation of lipids in the cytosol of cells. In these steady-state Arglabin and gemfibrozil at concentrations 75–100 μM and 0.25–1.0 mM, respectively, reduced the content of lipid in cells. Conclusion. In the model of hyperlipidemia induced by lipofundin, sesquiterpene γ-lactone Arglabin prevents the accumulation of lipids in the HTC cell line, as evidenced by a decrease in Nile Red fluorescence. However hypolipidemic effect of Arglabin is associated with cytotoxic effects, which is typical for anticancer drugs.